ds_etapa |
Mensalmente, ao longo de 12 meses, serão coletadas amostras de água e sedimento nos dois pontos amostrais. O material coletado será destinado à análise do teor de carbono orgânico, nutrientes a base de nitrogênio e fósforo, oxigênio dissolvido, temperatura, pH/Eh e granulometria, e determinação dos compostos e concentrações ambientais de agrotóxicos. As amostras para análise de contaminantes serão acondicionadas em vidros âmbar novos e descontaminados (água) ou recipientes de alumÃnio previamente calcinados (sedimento), e mantidos sob refrigeração até chegada no laboratório. Os procedimentos de extração e análise são descritos no item 5.4.Para extração das amostras de água, será utilizado a técnica de extração em fase sólida (SPE) adaptado de Demoliner et al. 2010. As amostras após serem coletadas, terão o pH ajustado em 3,0 com a adição de ácido fosfórico (1:1 v/v), e logo após serão filtradas em membrana 0,45 µm. Depois, a amostra será dividida em três réplicas de 250 mL, para serem permeadas através dos cartuchos em uma vazão de 2 mL min-1 até a secagem total. Depois será realizada a eluição dos analitos empregando 1 mL de metanol (500 + 500 µL). Após, os extratos serão injetados em triplicata no sistema cromatográfico.Para a extração dos agrotóxicos das amostras de sedimento será utilizada o método QuEChERS adaptado de Arias et al. 2014. As amostras de sedimento serão transportadas sob refrigeração ao laboratório, mantidas a 4° C e protegidas da luz até a etapa de extração, que deverá ocorrer em no máximo 48 horas. As amostras serão adicionadas de quantidade conhecida de solução de padrão interno e a maior parte do solvente será evaporado lentamente, à temperatura ambiente por no mÃnimo 24 horas antes da análise. Na sequência, 10 g do solo seco será colocado em tubo de poliropileno de 50 mL, onde será adicionado 100 µL de ácido acético e 10 mL de acetonitrila. A mistura será então agitada manualmente por 15 segundos e então agitada vigorosamente no vórtex por 1 minuto. A seguir, 4 g de sulfato de magnésio anidro e 1 g de cloreto de sódio será adicionado ao tubo e imediatamente agitada por 15 segundos, seguido de agitação no vórtex por mais 1 minuto. Após, a mistura será centrifugada nas seguintes a 5000 rpm por 5 minutos. Para a otimização da etapa de limpeza (clean-up), o sorbente (50 mg) e 150 mg de sulfato de magnésio serão adicionados a 2 ml do extrato, seguindo então para a mistura em vórtex por 1 minuto seguido de centrifugação a 4000 rpm por 5 minutos. O extrato será então transferido para um vial para subsequente determinação cromatográfica por LC-MS/MS.Para a extração dos agrotóxicos das amostras biológicas, será utilizada a técnica de dispersão da matriz em fase solida (MSPD), adaptada de Escarrone et al. 2014. FÃgados de rãs das espécies Pseudis minuta e Hypsiboas pulchellus serão extraÃdos dos animais e imediatamente mantidos em ultrafreezer à -80° C até o momento da análise. À alÃquotas de 0,5 g de amostra de fÃgado será adicionada solução de padrão interno e mantidas sob abrigo da luz até a evaporação do solvente (aproximadamente 1 hora). As amostras serão dispersadas e misturadas, com auxÃlio de gral e pistilo, juntamente com 0,5 g de sulfato de sódio e 0,5 g de C18, por aproximadamente 5 minutos, até obter-se uma mistura homogênea. A mistura será então cuidadosamente transferida para tubo de polipropileno de 15 mL, onde será adicionado 5 mL de acetonitrila. O conteúdo será agitado em vórtex por 1 min e então centrifugado nas seguintes condições: 8000 rpm por 15 minutos. O extrato coletado será então injetado no LC-MS/MS.Para a determinação dos agrotóxicos será empregado a cromatografia lÃquida acoplada a espectrometria de massas em série (LC-MS/MS). O sistema LC-MS/MS a ser empregado será um Cromatógrafo a lÃquido Alliance Separations Module 2695 (Waters, EUA) equipado com amostrador automático, bomba quaternária, forno para coluna e sistema de desgaseificação; colunas analÃticas, Detector MS, Micromass® Quatro Micro API (Waters, Inglaterra) com fonte API, com ionização por Electrospray ou APCI; sistema de aquisição de dados através do software MassLynx e QuanLynx 4.0 (Waters, Inglaterra). Sistema gerador de nitrogênio Peak Scientifics (Instruments Ltda., Escócia). |
ds_meta |
Esta meta persegue a criação de uma aplicação cliente-servidor, que permita o cadastro, web e mobile, de horários e funcionários do setor hospitalar, para gerar calendários de trabalho, atendendo as diferentes necessidades e restrições. Ela se encontra diretamente relacionada com o objetivo de influenciar no aperfeiçoamento das redes de saúde pública e privada, influenciando de forma positiva no desenvolvimento tecnológico e social. |