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Investigação do potencial energético na plataforma continental sul e sudeste do Brasil |
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Investigação do potencial energético da plataforma continental sul e sudeste do Brasil para instalação dos conversores de energia |
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Reuniões com os pesquisadores e equipe técnica |
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Reuniões com os pesquisadores e equipe técnica |
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Levantamento quali-quantitativo de agrotóxicos |
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Mensalmente, ao longo de 12 meses, serão coletadas amostras de água e sedimento nos dois pontos amostrais. O material coletado será destinado à análise do teor de carbono orgânico, nutrientes a base de nitrogênio e fósforo, oxigênio dissolvido, temperatura, pH/Eh e granulometria, e determinação dos compostos e concentrações ambientais de agrotóxicos. As amostras para análise de contaminantes serão acondicionadas em vidros âmbar novos e descontaminados (água) ou recipientes de alumÃnio previamente calcinados (sedimento), e mantidos sob refrigeração até chegada no laboratório. Os procedimentos de extração e análise são descritos no item 5.4.Para extração das amostras de água, será utilizado a técnica de extração em fase sólida (SPE) adaptado de Demoliner et al. 2010. As amostras após serem coletadas, terão o pH ajustado em 3,0 com a adição de ácido fosfórico (1:1 v/v), e logo após serão filtradas em membrana 0,45 µm. Depois, a amostra será dividida em três réplicas de 250 mL, para serem permeadas através dos cartuchos em uma vazão de 2 mL min-1 até a secagem total. Depois será realizada a eluição dos analitos empregando 1 mL de metanol (500 + 500 µL). Após, os extratos serão injetados em triplicata no sistema cromatográfico.Para a extração dos agrotóxicos das amostras de sedimento será utilizada o método QuEChERS adaptado de Arias et al. 2014. As amostras de sedimento serão transportadas sob refrigeração ao laboratório, mantidas a 4° C e protegidas da luz até a etapa de extração, que deverá ocorrer em no máximo 48 horas. As amostras serão adicionadas de quantidade conhecida de solução de padrão interno e a maior parte do solvente será evaporado lentamente, à temperatura ambiente por no mÃnimo 24 horas antes da análise. Na sequência, 10 g do solo seco será colocado em tubo de poliropileno de 50 mL, onde será adicionado 100 µL de ácido acético e 10 mL de acetonitrila. A mistura será então agitada manualmente por 15 segundos e então agitada vigorosamente no vórtex por 1 minuto. A seguir, 4 g de sulfato de magnésio anidro e 1 g de cloreto de sódio será adicionado ao tubo e imediatamente agitada por 15 segundos, seguido de agitação no vórtex por mais 1 minuto. Após, a mistura será centrifugada nas seguintes a 5000 rpm por 5 minutos. Para a otimização da etapa de limpeza (clean-up), o sorbente (50 mg) e 150 mg de sulfato de magnésio serão adicionados a 2 ml do extrato, seguindo então para a mistura em vórtex por 1 minuto seguido de centrifugação a 4000 rpm por 5 minutos. O extrato será então transferido para um vial para subsequente determinação cromatográfica por LC-MS/MS.Para a extração dos agrotóxicos das amostras biológicas, será utilizada a técnica de dispersão da matriz em fase solida (MSPD), adaptada de Escarrone et al. 2014. FÃgados de rãs das espécies Pseudis minuta e Hypsiboas pulchellus serão extraÃdos dos animais e imediatamente mantidos em ultrafreezer à -80° C até o momento da análise. À alÃquotas de 0,5 g de amostra de fÃgado será adicionada solução de padrão interno e mantidas sob abrigo da luz até a evaporação do solvente (aproximadamente 1 hora). As amostras serão dispersadas e misturadas, com auxÃlio de gral e pistilo, juntamente com 0,5 g de sulfato de sódio e 0,5 g de C18, por aproximadamente 5 minutos, até obter-se uma mistura homogênea. A mistura será então cuidadosamente transferida para tubo de polipropileno de 15 mL, onde será adicionado 5 mL de acetonitrila. O conteúdo será agitado em vórtex por 1 min e então centrifugado nas seguintes condições: 8000 rpm por 15 minutos. O extrato coletado será então injetado no LC-MS/MS.Para a determinação dos agrotóxicos será empregado a cromatografia lÃquida acoplada a espectrometria de massas em série (LC-MS/MS). O sistema LC-MS/MS a ser empregado será um Cromatógrafo a lÃquido Alliance Separations Module 2695 (Waters, EUA) equipado com amostrador automático, bomba quaternária, forno para coluna e sistema de desgaseificação; colunas analÃticas, Detector MS, Micromass® Quatro Micro API (Waters, Inglaterra) com fonte API, com ionização por Electrospray ou APCI; sistema de aquisição de dados através do software MassLynx e QuanLynx 4.0 (Waters, Inglaterra). Sistema gerador de nitrogênio Peak Scientifics (Instruments Ltda., Escócia). |
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Esta meta persegue a criação de uma aplicação cliente-servidor, que permita o cadastro, web e mobile, de horários e funcionários do setor hospitalar, para gerar calendários de trabalho, atendendo as diferentes necessidades e restrições. Ela se encontra diretamente relacionada com o objetivo de influenciar no aperfeiçoamento das redes de saúde pública e privada, influenciando de forma positiva no desenvolvimento tecnológico e social. |
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Uma aplicação para gerar calendários de trabalho dos funcionários do setor hospitalar |
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Efeitos biológicos de estressores oriundos de atividades antrópicas |
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Para as análises biológicas, organismos de três nÃveis tróficos diferentes serão coletados para a determinação das respostas dos organismos aos estressores ambientais: macrófitas terrestres e aquáticas, fitoplâncton, gastrópodes e anfÃbios.5.5.1 Ensaio do micronúcleo e outras anomalias nuclearesEm exemplares das macrófitas aquáticas e terrestres (espécies a definir), os micronúcleos e outras anomalias nucleares serão detectadas através de metodologia desenvolvida por Dash et al. (1988). Sumariamente, meristemas das raÃzes do vegetal serão coletados e fixados em ácido acético : etanol (1 : 3), em seguida corados com hematoxilina. As lâminas serão visualizadas em microscópio óptico sob magnificação de 1000x. Serão contadas 1000 células por lâmina, em duplicata.Para a contagem de micronúcleos no gastrópode Pomacea sp., uma pequena porção da concha sobre o coração será removida e a hemolinfa será coletada na cavidade cardÃaca. O material será centrifugado por 20 min a 3000g e 4°C, e os hemócitos resuspendidos em tampão salino (Itziou & Dimitriadis 2011). A hemolinfa será então esfregada em lâminas de vidro, secadas, fixadas com metanol e coradas com Giemsa. As lâminas serão visualizadas em microscópio óptico sob magnificação de 1000x. Serão contadas 1000 células por lâmina, em duplicata.Nas rãs, uma alÃquota de sangue será extraÃda através de punção cardÃaca, utilizando seringa heparinizada. Esfregaços de sangue periférico serão preparados sobre lâminas limpas, fixadas com metanol durante 10 minutos e coradas com o corante Giemsa (10% v/v). As lâminas serão visualizadas em microscópio óptico sob magnificação de 1000x. Serão contadas 1000 células por lâmina, em duplicata.Independente do organismo testado, os critérios de determinação dos micronúcleos (MN) serão de que o núcleo principal e os MN corados tem a mesma intensidade de coloração; o diâmetro do MN é menor do que o núcleo principal, tendo o MN no máximo 1/3 do tamanho do núcleo principal; o MN está dentro do citoplasma, não ligado ao núcleo principal; o MN está envolto por uma membrana nuclear; e não há sobreposição do MN com o núcleo principal (Lajmanovich et al., 2005).Outras anomalias nucleares também serão visualizadas nos diferentes organismos, como núcleo em forma de rim, núcleo lobulado, núcleo dentado (segundo Carrasco et al., 1990) e núcleo protundido (de acordo com Strunjak-Perovic et al., 2009).5.5.2 Análise da atividade da enzima acetilcolinesterase (AchE) A atividade da AchE será determinada em gastrópodes (hemolinfa e glândula digestiva) e nas rãs P. minuta e H. pulchellus (sangue e tecido nervoso), conforme protocolo descrito por Ellman et al. (1961). A análise consiste em medir a reação da tiocolina com o DTNB, que forma o ácido 5-tio-2-nitrobenzoico, um ânion amarelo detectado espectrofotometricamente a 412 nm. 5.6 Análise de Isótopos estáveisAmostras de uma espécie de gastrópode filtrador (Pomacea sp.) serão coletadas, a fim de servir como referência de consumidor primário para posterior análise de isótopos de nitrogênio. Os exemplares de Pomacea sp. serão coletados manualmente e armazenados em gelo até o processamento do tecido muscular. Para da composição isotópica dos exemplares de anfÃbios (rãs P. minuta e H. pulchellus), será coletado o músculo dos membros posteriores. Todas as amostras coletadas serão processadas seguindo o protocolo descrito por Garcia et al. (2007). Exemplares de fitoplâncton (pools), macrófitas terrestres e macrófitas aquáticas também serão utilizadas, servindo de referência de produtores primários de diferentes origens. Todo o material coletado será processado para se obter amostras em triplicata. Estas amostras serão armazenadas no gelo para o processamento e análise dos isótopos estáveis. A posição trófica (PT) dos anfÃbios será estimada a partir da equação PT = 2 + (15N - 15Nbase)/F, onde 15N é o valor individual da razão isotópica do nitrogênio de cada exemplar das espécies de anfÃbio analisado, 15Nbase representa o valor de nitrogênio de um consumidor de nÃvel trófico primário e F o fracionamento do nitrogênio por nÃvel trófico (Hoeinghaus & Zeug, 2008; Garcia et al., 2007). Para este cálculo será utilizada uma estimativa de fracionamento de +2,5 proposto por Vanderklift & Ponsard (2003). As diferenças estatÃsticas entre as médias da posição trófica (PT) entre os pontos de amostragem serão avaliadas através do teste t Student (Zar, 1994). |
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Esta meta persegue a melhoria das soluções propostas na literatura para os problemas abordados no projeto através de novos algoritmos desenvolvidos durante a pesquisa. |
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Melhoria das soluções na literatura |
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QuÃmica Ambiental |
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Mensalmente, ao longo de 12 meses, serão coletadas amostras de água e sedimento nos dois pontos amostrais. O material coletado será destinado à análise do teor de carbono orgânico, nutrientes a base de nitrogênio e fósforo, oxigênio dissolvido, temperatura, pH/Eh e granulometria, e determinação dos compostos e concentrações ambientais de agrotóxicos. Para a análise de carbono orgânico total (COT), as amostras serão acidificadas até pH 2,0 e levadas para o laboratório para determinação em um analisador de carbono. Uma alÃquota de amostra será filtrada (0,45 µm) para determinação de carbono orgânico dissolvido (COD).Nitrito, nitrato, fosfato e amônia serão analisados de acordo com Baumgarten et al (1996).Para análise granulométrica, o sedimento será peneirado através de malhas de diferentes tamanhos, para identificação e quantificação de cada partÃcula presente.Temperatura, pH/Eh e oxigênio dissolvido serão determinados em campo, com o auxÃlio de sondas especÃficas. |
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Esta meta persegue a criação de uma aplicação cliente-servidor, que permita o cadastro, web e mobile, de mapas e possÃveis pontos para abertura de centros de atendimento (fixos ou ambulatoriais) na rede de saúde pública, encontrando uma distribuição deles para garantir o atendimento das demandas populacionais. Ela se encontra diretamente relacionada com o objetivo de influenciar no aperfeiçoamento da rede de saúde pública e assim influenciar de forma positiva no desenvolvimento tecnológico e social. |
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Uma aplicação para encontrar uma boa distribuição de centros de atendimento da rede de saúde |
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Identificação de ferramentas para monitoramento ambiental |
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Em função da diversidade de ferramentas utilizadas para a investigação dos efeitos adversos das atividades antrópicas no entorno da ESEC-Taim, aquela que apresentar os melhores resultados em termo de confiabilidade, robustez e relação custo-benefÃcio, será indicada para a utilização em programas futuros de monitoramento da qualidade ambiental deste e de outros ecossistemas de banhados |
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Mostrar a mentalidade do inovador e as quatro categorias envolvidas com a criatividade. |
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Mentalidade do Inovador |
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PWG – Powering Growth é um projeto para facilitar o |
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